常见食源性致病菌PCR快速检测技术建立

• 作者: 何丽 叶桂煊 李君文 李秀梅 王宇 王新为 谌志强 邱志刚 陈照立
• 来源期刊: 中国公共卫生
• 学科: 医学
• 关键词: 食源性致病菌 聚合酶链式反应(PCR) 快速检测
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 检验技术
• 页码范围: 1487-1489
• 分类号: R155.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.11847/zgggws2014-30-11-39

摘要

目的 验证常见食源性致病菌聚合酶链式反应(PCR)检测方法特异性,并建立相应的快速简便PCR检测新体系.方法 利用166株实验菌株验证4种常见食源性致病菌PCR检测方法的特异性;同时,针对副溶血性弧菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌的toxR、fimY、nuc、hly基因序列设计特异引物,通过统一PCR反应条件和缩短反应时间,实现对4种常见食源性致病菌的快速检测.结果 4种常见食源性致病菌PCR检测方法存在一定问题,不仅相关引物特异性差,而且操作繁琐、反应参数不统一、细菌总体检测周期长;而新建立的相应PCR检测体系具有良好的特异性和灵敏度,不仅能特异性扩增出目的片段,而且特异性达100％,其他干扰菌株均不能获得阳性结果,对致病菌DNA的检测限值为6 pg;用该方法对人工污染食品样品进行检测,准确率为100％;完成检测的时间在3～4h以内.结论 成功建立常见食源性致病菌的PCR快速检测技术,操作步骤简单、检测时间短,特异性强、灵敏度高.