SYBR实时荧光定量PCR检测人乳腺癌细胞AnnexinⅡmRNA方法的建立及应用

• 作者: 吴立翔 郭变琴 黄学梅
• 来源期刊: 重庆医学
• 关键词: 乳腺肿瘤 AnnexinⅡ SYBR Green实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2014,（18）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 2323-2325
• 页数: 3页
• 字数: 3627字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2014.18.021

摘要

目的：建立检测人AnnexinⅡmRNA水平的SYBR Green实时荧光定量PCR方法，并用其测定人乳腺癌细胞MDA-MB-231和 MCF-7中AnnexinⅡmRNA水平。方法根据人AnnexinⅡ mRNA的保守序列设计特异性引物，提取人乳腺癌细胞总 RNA，并逆转录为cDNA，胶回收纯化PCR产物，并与pGM-T载体连接构建质粒标准品，进一步通过SYBR Green实时荧光定量PCR检测人乳腺癌细胞中 Annexin ⅡmRNA水平。结果该方法标准曲线的r2为0．997，融解曲线分析显示单个峰，pGM-T AnnexinⅡ质粒标准品高、低拷贝数的批内、批间变异系数分别为6．2％、7．8％（高拷贝）和9．1％、12．3％（低拷贝）。进一步研究表明人乳腺癌细胞 MDA-MB-231中 AnnexinⅡmRNA水平显著高于 MCF-7细胞（P＜0．01）。结论建立的检测人 AnnexinⅡmRNA水平的 SYBR Green实时荧光定量PCR方法特异性、重复性好，可用于人乳腺癌细胞中 AnnexinⅡ mRNA的定量检测。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴立翔	重庆市肿瘤研究所检验科	41	297	9.0	15.0
2	黄学梅	重庆市肿瘤研究所检验科	26	263	8.0	15.0
3	郭变琴	重庆市肿瘤研究所检验科	13	86	6.0	9.0