真核表达载体pIRES2-AcGFP1-Asc12的构建及表达

• 作者: 刘津麟 李涯松 陈彦霞
• 来源期刊: 中国现代医生
• 学科: 医学
• 关键词: Ascl2 HEK293T细胞 Tfh细胞 自身免疫性疾病
• 年，卷（期）: 2014,（21）
• 所属期刊栏目: 基础实验研究
• 页码范围: 5-7
• 页数: 3页
• 分类号: R73-3
• 字数: 2602字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建真核表达载体pIRES2-AcGFP1-Ascl2,并在真核细胞HEK293T细胞中表达,为今后研究Ascl2基因在Tfh细胞的相关分子机制奠定实验基础.方法 PCR方法扩增健康人外周血单个核细胞中Ascl2基因,连接至pIRES2-AcGFP1质粒的多克隆位点中,构建pIRES2-AcGFP1-Ascl2重组质粒.通过脂质体转染法对HEK293T细胞进行转染.Realtime-PCR及Westernblot方法分析转染pIRES2-AcGFP1-Ascl2重组质粒的HEK293T细胞中Ascl2表达情况.结果 经Realtime-PCR及Westernblot方法,证实Ascl2基因能够在HEK293T细胞中正确表达.结论 成功建立表达Ascl2基因的pIRES2-AcGFP1-Ascl2重组质粒,并能在HEK293T细胞中表达,为进一步研究Ascl2在自身免疫性疾病中Tfh细胞的相关机制奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李涯松	浙江省人民医院风湿免疫科	20	52	5.0	6.0
2	刘津麟	浙江省人民医院检验中心	4	28	2.0	4.0
3	陈彦霞	浙江省人民医院风湿免疫科	2	5	1.0	2.0