菠菜SoHb基因的原核表达及功能分析

• 作者: 严金平 徐慧妮 李昆志 白学贵 郭兆来 陈宣钦
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 非共生血红蛋白 大肠杆菌表达 硝化胁迫
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 54-59
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.20150408

摘要

为了进一步揭示菠菜非共生血红蛋白(SoHb)的功能,通过RT-PCR的方法从菠菜根中克隆了SoHb基因编码区全长序列,并将其克隆到原核表达载体pET32a上,构建原核表达载体pET32a-SoHb,并转化大肠杆菌BL21 star(DE3)获得原核表达工程菌株.通过IPTG法诱导该重组质粒在大肠杆菌中得到高效表达,融合蛋白分子质量约为38 kDa,且在上清液和包涵体中均有表达,可溶性部分经Ni2+ NTA亲和柱纯化,获得纯化的融合蛋白.与空载体相比,重组菌对硝化胁迫的抗性增加.以纯化的融合蛋白为抗原免疫昆明小鼠,制备多克隆抗体,并对其进行了Western blot检测.实验结果为进一步研究菠菜SoHb基因功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李昆志	昆明理工大学生命科学与技术学院	73	471	13.0	16.0
2	徐慧妮	昆明理工大学生命科学与技术学院	19	122	8.0	10.0
3	严金平	昆明理工大学生命科学与技术学院	17	37	4.0	5.0
4	陈宣钦	昆明理工大学生命科学与技术学院	25	54	5.0	7.0
5	郭兆来	昆明理工大学生命科学与技术学院	3	3	1.0	1.0
6	白学贵	昆明理工大学生命科学与技术学院	3	10	1.0	3.0