菠菜SoGSNOR基因的克隆及原核表达

• 作者: 徐慧妮 李昆志 白学贵 郭兆来
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: S-亚硝基谷胱甘肽还原酶 原核表达 菠菜
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 页码范围: 80-85
• 页数: 6页
• 分类号: Q78|S636.03
• 字数: 3063字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2018.01.013

摘要

亚硝基谷胱甘肽还原酶(S-nitrosoglutathione reductase,GSNOR)在生物体中调控信号分子一氧化氮(NO)的代谢和平衡.为了深入研究GSNOR的功能,利用RT-PCR和RACE(Rapid-amplification of cDNA ends)技术从菠菜根中克隆了SoGSNOR基因的全长序列,该基因编码框1140 bp,编码379个氨基酸,GenBank登录号为KR381778.将其克隆到原核表达载体pET32a上,构建原核表达载体pET32a-SoGSNOR,并转化大肠杆菌BL21 star(DE3),通过IPTG诱导重组SoGSNOR在大肠杆菌BL21 star(DE3)中高效表达,表达的融合蛋白分子质量约为65 ku,且在上清液和包涵体中均有表达,可溶性部分经Ni2+NTA亲和柱纯化,获得纯化蛋白,并注射昆明小鼠,制备多克隆抗体,并对其进行了Western Blot检测,结果表明,稀释10000倍的抗血清能够检测到与预期SoGSNOR大小一致的目的条带.试验结果为进一步研究菠菜SoGSNOR基因功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李昆志	昆明理工大学生命科学与技术学院	73	471	13.0	16.0
2	徐慧妮	昆明理工大学生命科学与技术学院	19	122	8.0	10.0
3	郭兆来	昆明理工大学生命科学与技术学院	3	3	1.0	1.0
4	白学贵	昆明理工大学生命科学与技术学院	3	10	1.0	3.0