弱化抗性标记筛选高表达 CHO 细胞株的方法建立

• 作者: 刘苏 姚文兵 王驰 田浤
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 中国仓鼠卵巢细胞 新霉素磷酸转移酶 增强型绿色荧光蛋白 高表达系统
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 页码范围: 617-622
• 页数: 6页
• 分类号: Q819
• 字数: 4571字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20150517

摘要

为了优化中国仓鼠卵巢细胞（ CHO）表达体系，建立高表达CHO细胞株筛选方法，将外源基因表达载体上抗性筛选基因表达的新霉素磷酸转移酶（ NPT）的261位氨基酸天冬氨酸突变成甘氨酸。经G418筛选，转染含突变型NPT表达载体的细胞存活率显著低于转染含野生型NPT表达载体的细胞存活率。以绿色荧光蛋白-抗体IgG1 Fc结构域融合蛋白为报告基因，验证了突变后新霉素磷酸转移酶对抗生素G418抗性减弱。经G418持续加压培养3周后，转染含突变型NPT表达载体的细胞中EGFP的表达量显著高于转染含野生型NPT表达载体的细胞，表明其具有筛选出高表达单克隆细胞株的潜力。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚文兵	中国药科大学生命科学与技术学院	140	842	17.0	23.0
2	田浤	中国药科大学生命科学与技术学院	35	69	6.0	7.0
3	刘苏	中国药科大学生命科学与技术学院	39	247	8.0	14.0
4	王驰	中国药科大学生命科学与技术学院	2	3	1.0	1.0