拟南芥抗病相关基因T1N6_22的原核表达分析

• 作者: 樊锦涛 王冠宇 瓮巧云 董丽萍 董金皋 蒋琛茜 邢继红
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 拟南芥 T1N6_22 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 页码范围: 73-76
• 页数: 4页
• 分类号: S432.1|Q78
• 字数: 4049字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2015.01.012

摘要

为构建拟南芥抗病相关T1 N6＿22基因的原核表达载体并进行高效表达，获得纯化的T1 N6＿22蛋白，以拟南芥Col-0的cDNA为模板，扩增获得了T1N6＿22基因CDS，对其进行克隆、测序后与含有GST标签蛋白的pGEX4T-1载体相连，构建T1N6＿22的原核表达载体pGEX4T-1-T1N6＿22-GST。经酶切和测序鉴定正确后，将构建好的载体及空载体转化大肠杆菌BL21。结果表明，在大肠杆菌BL21菌株中成功表达了与标签蛋白融合的T1 N6＿22蛋白，大小约57 kDa。 SDS-PAGE分析表明，高效表达的诱导条件为0．1 mmol／L IPTG诱导培养3 h。研究结果为进一步T1N6＿22互作蛋白的筛选及其调控拟南芥抗病分子机制的研究奠定了基础。