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摘要:
为了体外获得可溶性的拟南芥AtRD22蛋白,以拟南芥叶片提取的总核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)为模版,反转录获得AtRD22的全长互补脱氧核糖核酸(complementary deoxyribonucleic acid,cDNA),分别构建AtRD22的原核重组表达载体pET32a-RD22和pSUMO-RD22,并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行AtRD22蛋白的表达.在0.3 mmol/L的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-dithiogalactopyr-anoside,IPTG)诱导下,探索不同培养温度和诱导时间对可溶性蛋白表达的影响.结果表明,在实验条件下,转化pET32a-RD22的重组菌表达AtRD22蛋白的总量高于转化pSUMO-RD22的重组菌,但后者的可溶性AtRD22蛋白表达量明显高于前者.当诱导温度为28或16℃,时间分别为6.0或8.0h以上时,转化pSUMO-RD22的重组菌中可溶性目的蛋白的表达量相对较大.为进一步在体外研究AtRD22蛋白质的结构和功能奠定了基础.
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文献信息
篇名 利用SUMO技术表达可溶性的拟南芥AtRD22蛋白
来源期刊 深圳大学学报(理工版) 学科 生物学
关键词 蛋白质工程 拟南芥AtRD22 融合标签 小泛素相关修饰物 基因克隆 原核表达
年,卷(期) 2015,(6) 所属期刊栏目 生物工程
研究方向 页码范围 610-616
页数 7页 分类号 Q943.2|Q786
字数 5111字 语种 中文
DOI 10.3724/SP.J.1249.2015.06610
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 江年琼 深圳大学生命与海洋科学学院 7 22 3.0 4.0
3 唐玉林 深圳大学生命与海洋科学学院 10 32 4.0 5.0
7 米子岚 深圳大学生命与海洋科学学院 2 5 1.0 2.0
8 钟活权 1 5 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
蛋白质工程
拟南芥AtRD22
融合标签
小泛素相关修饰物
基因克隆
原核表达
研究起点
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研究分支
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
深圳大学学报(理工版)
双月刊
1000-2618
44-1401/N
大16开
深圳市南山区深圳大学行政楼419室
46-206
1984
chi
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