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人肝细胞生长因子基因重组慢病毒载体的构建及其在成肌干细胞中的表达
人肝细胞生长因子基因重组慢病毒载体的构建及其在成肌干细胞中的表达
作者:
刘菲
朱敏辉
李孟
汤维芳
郑宏良
陈世彩
陈东辉
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
人肝细胞生长因子
慢病毒
喉肌
成肌干细胞
摘要:
目的:构建人肝细胞生长因子(human hepatocyte growth factor ,hHGF)基因重组pCMV -G﹠NR-U6-hHGF慢病毒载体,并检测其在成肌干细胞系C2C12细胞中的hHGF表达,为治疗失神经喉肌纤维化的研究提供依据。方法采用RT -PCR法扩增并纯化得到hHGF基因片段,并将其克隆到 pCM V -G﹠ NR -U6上,再将重组慢病毒载体转化入感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性菌落并行BamHI和 HindⅢ双酶切鉴定。对筛选后的重组质粒阳性克隆行PCR鉴定和测序,将表达质粒与包装质粒共转染293T细胞包装hHGF慢病毒,荧光显微镜检测病毒滴度,再进一步转染C2C12细胞(分为空白对照组、空载体组、HGF重组慢病毒过表达组),最后行PCR和WB检测HGF的表达情况。结果 PCR鉴定和测序结果显示所构建的慢病毒载体正确无误,包装后的病毒滴度>1×109 IU/mL ;慢病毒过表达组的 HGF表达量均较空白对照组、空载体组明显增高,而且72 h仍有稳定的表达。结论本实验成功构建了慢病毒载体pCMV -G﹠NR-U6-hHGF ,并能够在离体培养的成肌干细胞系C2C12细胞中稳定高效表达 HGF ,为治疗失神经喉肌等骨骼肌纤维化、提高神经修复效果的实验研究提供了依据。
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分子生物学
肝细胞生长因子基因腺病毒重组体的构建
基因重组
基因表达,肝细胞生长因子
腺病毒载体
同源重组
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绿色荧光蛋白
重组人肝细胞生长因子在人脐带间质干细胞中高效表达
肝细胞生长因子
慢病毒载体
载体构建
脐带间质干细胞
基因表达
人血管内皮生长因子165基因慢病毒载体的构建及其在人胚胎神经干细胞中的表达
血管内皮生长因子类
慢病毒载体
神经干细胞
转染
携带人血管内皮生长因子165慢病毒表达载体的构建与表达
人血管内皮生长因子165
慢病毒载体
BLR
3A
大鼠肝细胞
转染
基因治疗
内容分析
文献信息
引文网络
相关学者/机构
相关基金
期刊文献
内容分析
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关键词热度
相关文献总数
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文献信息
篇名
人肝细胞生长因子基因重组慢病毒载体的构建及其在成肌干细胞中的表达
来源期刊
听力学及言语疾病杂志
学科
医学
关键词
人肝细胞生长因子
慢病毒
喉肌
成肌干细胞
年,卷(期)
2015,(1)
所属期刊栏目
实验研究
研究方向
页码范围
45-49
页数
5页
分类号
R767.6+2
字数
3753字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1006-7299.2015.01.012
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
郑宏良
第二军医大学长海医院耳鼻咽喉头颈外科
133
504
11.0
14.0
2
朱敏辉
第二军医大学长海医院耳鼻咽喉头颈外科
26
60
4.0
5.0
3
陈世彩
第二军医大学长海医院耳鼻咽喉头颈外科
40
128
6.0
7.0
4
李孟
第二军医大学长海医院耳鼻咽喉头颈外科
15
49
4.0
6.0
5
陈东辉
第二军医大学长海医院耳鼻咽喉头颈外科
27
95
5.0
8.0
6
刘菲
第二军医大学长海医院耳鼻咽喉头颈外科
13
38
4.0
5.0
7
汤维芳
第二军医大学长海医院耳鼻咽喉头颈外科
3
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传播情况
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研究主题发展历程
节点文献
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慢病毒
喉肌
成肌干细胞
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
听力学及言语疾病杂志
主办单位:
武汉大学人民医院
出版周期:
双月刊
ISSN:
1006-7299
CN:
42-1391/R
开本:
大16开
出版地:
武汉市武昌区紫阳路5号
邮发代号:
38-224
创刊时间:
1993
语种:
chi
出版文献量(篇)
4028
总下载数(次)
8
总被引数(次)
21913
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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听力学及言语疾病杂志2005
听力学及言语疾病杂志2004
听力学及言语疾病杂志2003
听力学及言语疾病杂志2002
听力学及言语疾病杂志2001
听力学及言语疾病杂志2000
听力学及言语疾病杂志1999
听力学及言语疾病杂志2015年第6期
听力学及言语疾病杂志2015年第5期
听力学及言语疾病杂志2015年第4期
听力学及言语疾病杂志2015年第3期
听力学及言语疾病杂志2015年第2期
听力学及言语疾病杂志2015年第1期
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