猪瘟病毒Npro蛋白的原核表达与多抗制备

• 作者: 刘珂 史子学 李玉明 武专昌 王鑫 赵秋华 邱亚峰 邵东华 魏建超
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟 Npro 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 病毒
• 页码范围: 7-12
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 4196字
• 语种: 中文

摘要

为更好研究猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV) Npro蛋白的生物学功能,RT-PCR扩增CSFV的Npro基因,克隆至pCold Ⅰ质粒并转化BL21(DE3)表达菌.经IPTG诱导,成功表达了约24 kDa的重组蛋白His-Npro,用镍离子亲和层析柱进行纯化后,制备了兔源多克隆抗体Western blot结果显示,制备的多克隆抗体能特异性识别猪瘟病毒感染PK15细胞内表达的约23kDa的Npro蛋白,但此抗体不能用于Npro蛋白的间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay,IFA)检测.纯化的重组蛋白His-Npro和制备的Nprp多抗为Npro蛋白功能研究奠定了基础.