猪瘟病毒Core蛋白的原核表达和抗体制备及应用

• 作者: 何丹妮 刘珂 周斌 张小敏 景娇 陈溥言
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 Core蛋白 原核表达 抗血清
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 7-11
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3583字
• 语种: 中文

摘要

根据猪瘟病毒衣壳蛋白(Core)基因序列设计一对特异性引物,RT-PCR从猪瘟兔化弱毒中扩增出完整的Core基因,经酶切和序列测定后,克隆到携带His标签的原核表达载体pColdI中,成功构建了重组质粒pCold-Core,并转化到大肠杆菌Rosseta 2(R2)中;利用IPTG诱导表达目的蛋白并鉴定表达效果.结果表明:经终浓度为0.1 mmol/L IPTG诱导24 h后,Core基因在R2中获得分泌性可溶表达,表达量占菌体蛋白的32.6％,SDS-PAGE显示目的蛋白相对分子质量为20 ku.Western blot结果显示Core蛋白可以分别与His单抗和猪瘟病毒阳性抗血清发生特异性反应,均出现单一反应带.将目的蛋白切胶后免疫Balb/c小鼠,制备特异性抗血清,Western blot结果显示该抗血清与衣壳蛋白反应后有明显的特异性条带,经激光共聚焦鉴定抗血清能够与胞浆中的猪瘟病毒粒子发生反应.结果表明,Core基因表达成功,制备的抗血清具有生物学功能.本研究为深入探讨Core蛋白在猪瘟病毒致病机制上的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈溥言	南京农业大学动物医学院	269	2875	28.0	40.0
2	周斌	南京农业大学动物医学院	62	792	17.0	26.0
3	景娇	南京农业大学动物医学院	3	39	2.0	3.0
4	何丹妮	南京农业大学动物医学院	3	18	2.0	3.0
5	张小敏	南京农业大学动物医学院	7	62	3.0	7.0
6	刘珂	中国农业科学院上海兽医研究所	7	20	2.0	4.0