猪瘟病毒 E0蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 张必凯 张莉 涂长春 谢金鑫 贾俊杰 郭焕成 龚文杰
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 E0蛋白 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 5-9,10
• 页数: 6页
• 分类号: S852.651
• 字数: 4484字
• 语种: 中文

摘要

为表达猪瘟病毒 E0蛋白并制备其多克隆抗体，本研究构建 E0蛋白的原核表达载体，转化至BL21（DE3）菌株，IPTG 诱导表达，亲和层析及切胶回收纯化重组蛋白。SDS-PAGE 和 Western blot 分析显示 E0重组蛋白主要以包涵体形式表达，亲和层析纯化获得了 E0重组蛋白，用其免疫 Balb／c 小鼠4次制备E0重组蛋白的多克隆抗体。间接 ELISA 显示，免疫小鼠血清中 E0蛋白抗体效价为1∶50000。获得的 E0蛋白多抗能与病毒感染细胞及 E0-EGFP 融合表达细胞中天然结构的 E0蛋白发生特异性反应。本研究制备的 E0重组蛋白及其多克隆抗体为进一步研究 E0蛋白的功能和免疫原性奠定了基础。