利用改良的CRISPR/Cas9基因编辑系统构建HeLa细胞SND1基因敲除稳定株

• 作者: 付雪 刘郁莹 崔晓腾 杨洁 苏超 葛林 赵秀娟 高星杰
• 来源期刊: 天津医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: SND1 基因敲除 CRISPR/Cas9 HeLa细胞
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 论著 -- 基础医学
• 页码范围: 480-483
• 页数: 4页
• 分类号: Q7
• 字数: 2631字
• 语种: 中文

摘要

目的：利用改良的CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除HeLa细胞中SND1基因，构建HeLa细胞SND1基因敲除稳定株。方法：设计一对特异性识别SND1基因第二个启动子的上下游sgRNA，以PX462质粒为载体，构建出一对重组真核表达质粒。酶切和测序鉴定后，将一对重组质粒共同转染进入HeLa细胞中，使用嘌呤霉素进行阳性细胞筛选，挑取单克隆细胞进行培养。最后用Western Blot鉴定敲除效果。结果：sgRNA正确插入到PX462质粒载体中，转染并筛选单克隆后的细胞中没有SND1蛋白的表达。结论：成功构建出HeLa细胞SND1基因敲除稳定株。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨洁	天津医科大学生物化学系	56	151	7.0	10.0
5	葛林	天津医科大学生物化学系	15	45	4.0	5.0
6	付雪	天津医科大学生物化学系	10	10	2.0	2.0
7	高星杰	天津医科大学基础医学研究中心	18	24	3.0	3.0
8	赵秀娟	天津医科大学细胞生物学系	13	62	5.0	7.0
9	苏超	天津医科大学基础医学研究中心	11	8	2.0	2.0
10	刘郁莹	天津医科大学生物化学系	14	20	3.0	4.0
11	崔晓腾	天津医科大学生物化学系	5	9	2.0	3.0