Nrdp1 siRNA重组腺病毒载体的构建及其对心肌肥大的影响

• 作者: 刘佳 张圆 张坤 牛常存 王艳国 胡海 韩丽莎
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: Nrdp1基因 小干扰RNA 腺病毒载体 心肌肥大
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 352-356
• 分类号: Q29
• 语种: 中文

摘要

目的 构建及鉴定神经调节素受体蛋白1(Nrdp1)基因siRNA重组腺病毒载体,初步研究Nrdp1基因对心肌细胞肥大的影响.方法 设计并合成Nrdp1的siRNA靶向DNA序列,克隆至穿梭载体GV119中,并与腺病毒骨架质粒AdMax在BJ5183细菌中进行同源重组,转染HEK293细胞,包装得到含siNrdp1的重组腺病毒,实时定量PCR及Western blot检测重组腺病毒对新生大鼠原代心肌细胞Nrdp1表达的影响.然后利用血管紧张素Ⅱ和沉默Nrdp1的腺病毒干预体外培养的新生大鼠原代心肌细胞,实时定量PCR检测心肌肥大标志基因(ANF、β-MHC、Skeletal-α-actin)的表达.结果 酶切后PCR分析、测序鉴定表明,干扰Nrdp1腺病毒构建成功,病毒纯化后滴度为1.5E +9 PFU/mL;重组干扰Nrdp1腺病毒可在蛋白水平和mRNA水平明显抑制Nrdp1的表达(P＜0.001);沉默Nrdp1基因后,可明显上调血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大标志基因ANF、β-MHC和Skeletal-α-actin的表达(P＜0.01).结论 构建的Nrdp1 siRNA重组腺病毒能有效地抑制新生大鼠原代心肌细胞中Nrdp1表达,且Nrdp1基因沉默后可加重AngⅡ诱导的心肌细胞肥大.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩丽莎	包头医学院病理生理学教研室	79	291	8.0	14.0
2	张圆	包头医学院病理生理学教研室	18	26	3.0	4.0
3	张坤	包头医学院病理生理学教研室	25	63	5.0	7.0
4	胡海	包头医学院病理生理学教研室	37	75	6.0	6.0
5	王艳国	包头医学院病理生理学教研室	19	42	4.0	4.0
6	刘佳	包头医学院病理生理学教研室	21	21	3.0	4.0
7	牛常存	包头医学院第一附属医院神经外科	4	13	2.0	3.0