日本沼虾MT基因克隆、组织差异性表达及与饲料铜、锌含量的相关性

• 作者: 丁志丽 叶金云 孔有琴 李二超 杜震宇 陈立侨
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 日本沼虾 金属硫蛋白 铜 锌 mRNA表达
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 页码范围: 1126-1133
• 页数: 8页
• 分类号: S966.1
• 字数: 5573字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7541/2015.148

摘要

为了更全面理解日本沼虾(Macrobrachium nipponense)的铜/锌营养生理作用,研究利用RACE技术从日本沼虾肝胰腺中克隆获得一金属硫蛋白基因cDNA全长(mn-MT),并对该基因分子特征、组织表达谱和饲料铜/锌水平对其表达的影响进行分析。结果显示：(1)mn-MT cDNA全长665 bp,含编码59个氨基酸的180 bp的开放阅读框,预测该多肽的理论分子量为6.085 kD,等电点为7.73。该蛋白中半胱氨酸含量最高(30.5%),其次是赖氨酸(16.95%)和丝氨酸(10.17%)。相似性分析显示 mn-MT 氨基酸序列与美洲海螯虾、斑节对虾和中华绒螯蟹MT的相似性分别达到78%、75%和75%。(2)qRT-PCR分析显示,mn-MT mRNA在肝胰腺、血细胞、鳃、胃、卵巢、肠和肌肉中都有表达,其中肝胰腺中表达量最高。(3)用4组铜添加量分别为0、20、40及160 mg/kg的饲料和3组锌添加水平分别为0、35和210 mg/kg的饲料饲喂初重为(0.101±0.002) g日本沼虾56d后,分析各组虾肝胰腺的mn-MT mRNA表达。mn-MT mRNA表达随饲料铜水平的提高而升高,到40 mg/kg组达到最高(P<0.05),而后开始下降；饲料中高锌(210 mg/kg)显著提高mn-MT表达(P<0.05),0和35 mg/kg组间差异不显著(P>0.05)。结果表明饲料中铜/锌均可影响mn-MT表达,且呈现不同的剂量依赖效应。