乳腺特异性共表达4种脂肪酸合成酶载体及其稳转山羊成纤维细胞系的构建

• 作者: 孙秀柱 张明翔 张运海 潘开源 石恒波 章孝荣 陈建文 陈真
• 来源期刊: 安徽农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 山羊 乳品质 n-3多不饱和脂肪酸 多基因共表达载体
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 动物科学与动物医学
• 页码范围: 417-423
• 分类号: S827
• 语种: 中文
• DOI: 10.13610/j.cnki.1672-352x.20150424.014

摘要

为改善山羊乳品质,创制乳汁中富含n-3不饱和脂肪酸的奶山羊育种新材料,首先构建了一种山羊乳腺特异性表达载体,以实现n-3不饱和脂肪酸合通路中4种脂肪酸合成酶基因(at-1,ads2,elovl5和scd-1)的共表达.为初步验证该载体的有效性,通过脂质体法转染小鼠乳腺上皮细胞系C127,经G418筛选收集阳性C127转基因细胞,并对其进行反转录PCR(RT-PCR)检测.结果表明,4种基因均可在C127细胞转基因中表达.将该多基因共表达载体转染奶山羊成纤维细胞,通过G418筛选获得了稳定转染的细胞系.PCR结果显示,4个目的基因均成功整合到奶山羊成纤维细胞基因组中.总之,本研究成功构建了乳腺特异性共表达4种脂肪酸合成酶转基因载体及其山羊转基因细胞系,为创制乳腺特异性表达多不饱和脂肪酸的转基因奶山羊奠定了基础.