甘蓝纤维素合成酶基因BoCesA的克隆与序列分析

• 作者: 向娟 徐凤凤 李双桃 李殿波 石锦 赵冰 连蔚然 郭仰东
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 甘蓝 纤维素合成酶基因 亚细胞定位 组织特异性表达 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 页码范围: 131-137
• 分类号: S635
• 语种: 中文
• DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2015.06.17

摘要

为研究甘蓝纤维素合成酶BoCesA基因在干旱胁迫下的表达模式,通过同源克隆得到甘蓝纤维素合成酶基因的cDNA全长,利用生物信息学软件分析该基因的特征;构建含BoCesA和GFP的融合表达载体,通过基因枪转化洋葱表皮细胞试验对该基因进行亚细胞定位;利用荧光定量PCR分析基因在不同组织中的表达情况及干旱胁迫下的表达模式.甘蓝纤维素合成酶BoCesA基因的cDNA全长为2 721 bp,编码906个氨基酸,在N端含有锌指结构域和2个跨膜区,C端含有6个跨膜区,除包含植物纤维素合成酶基因共有的保守区外,还包含2个高突变区.通过氨基酸序列比对分析,发现甘蓝的该基因与拟南芥的AtCesA3基因同源性较高.亚细胞定位表明BoCesA基因初步定位于细胞质膜上.荧光定量PCR分析表明该基因在叶中的表达量高于茎和根中的表达量,在NaCl、PEG处理下BoCesA表达量呈现先升高后下降的趋势.通过对甘蓝纤维素合成酶BoCesA基因在NaCl、PEG胁迫下的表达分析,预测该基因对干旱胁迫有响应,它的表达受干旱胁迫的影响,这为进一步研究基因功能奠定了基础.