人羧基肽酶 H不同区段抗原的克隆表达及其初步应用

• 作者: 冯晓燕 刘喜明 宋晓国 宗克亮 张贺秋 朱翠侠 杨锡琴 王国华 胡纪文 赵琰枫 郭兰芹
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人羧基肽酶H 自身抗体 新诊断2型糖尿病 成人隐匿性自身免疫性糖尿病
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 10-13
• 页数: 4页
• 分类号: R587.1|Q786
• 字数: 3396字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2015.04.003

摘要

目的：构建人羧基肽酶 H 不同区段抗原的原核表达载体，诱导表达获得重组蛋白，初步验证人羧基肽酶 H 不同抗原区段在羧基肽酶 H 自身抗体检测中的应用价值。方法应用 RT-PCR 方法调取目的基因，构建相应的原核表达质粒，转化大肠埃希氏菌诱导表达重组蛋白，用重组蛋白作为包被抗原建立人羧基肽酶 H 自身抗体的间接 ELISA 方法，评价羧基肽酶 H 抗原在检测新诊断2型糖尿病患者抗羧基肽酶 H 自身抗体中的应用价值。结果获得了羧基肽酶 H 三种不同区段抗原，其中42～476氨基酸区段为较理想的抗原。以该全长抗原作为包被抗原检测95例新诊断2型糖尿病患者，羧基肽酶 H 自身抗体阳性率为8.42％。结论原核克隆表达的人羧基肽酶 H 42～476氨基酸区段抗原具有良好的抗原性，可作为成人隐匿性自身免疫性糖尿病鉴别诊断的候选抗原。