不同方法检测食源性致病菌的对比研究

• 作者: 罗宇鹏
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 关键词: 食品安全 食源性致病菌 多重PCR 基因芯片
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 918-919,922
• 页数: 3页
• 字数: 2853字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2015.07.023

摘要

目的：探讨基因芯片技术和多重PCR技术用于检测和筛查食源性致病菌的可行性。方法通过设计靶细胞引物序列，采用生物素标记反向引物5′端，氨基基团标记寡核苷酸探针5′端。将探针在固相载体上点样，制备基因芯片，PCR产物与芯片点制探针区域进行杂交，并对PCR杂交反应的体系进行优化。结果基因芯片技术可以同时检测志贺氏菌、沙门氏菌、肺炎克雷伯菌、布鲁氏菌、奇异变形菌、金黄色葡萄球菌和空肠弯曲菌等多种病原菌，操作简便，特异性强。细菌纯培养物灵敏度为5．0×102CFU／mL，DNA检测灵敏度为0．1pg，检测分离菌株符合率为100％。利用引物建立和优化了PCR检测体系，分别确定了Mg2＋浓度和退火温度Tm值为1．5mmol／L和56℃，检测灵敏度达到10pg，此灵敏度下可以扩增出全部特异性引物条带。结论通过基因芯片技术和多重PCR技术可以有效检测食源性致病菌，为高通量筛查检测病原菌提供了新思路，值得在食品安全领域推广应用。