犬细小病毒NY株VP2蛋白的原核表达及反应原性鉴定

• 作者: 卜宾 唐存多 唐青海 姚伦广 杨建伟 毛倩倩 焦铸锦 阚云超
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 犬细小病毒NY株 VP2 原核表达 鉴定
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 24-29
• 页数: 6页
• 分类号: S852.655
• 字数: 4226字
• 语种: 中文

摘要

犬细小病毒(CPV)编码的VP2基因容易发生变异,导致病毒嗜性和致病性的改变.为制备一株高致病性的CPV毒株(NY株,基因型为2a型)重组VP2蛋白,构建重组原核表达载体pET28a-CPV-VP2,转化E.coli BL21(DE3)表达菌株,通过不同温度、不同IPTG浓度和不同诱导时间等条件的优化进行表达蛋白,采用SDS-PAGE和Western blot进行蛋白鉴定.结果表明,重组CPV-NY毒株VP2蛋白(rVP2)的分子质量约为72 ku,在不同温度条件下均以包涵体形式存在,在37℃条件下以终浓度为0.2mmoL/L IPTG诱导4h表达量达到最高.rVP2不仅与His标签mAb反应,也能与CPV特异性阳性血清反应,说明rVP2具有良好的反应原性,为CPV抗体检测试剂盒和基因工程疫苗的研究奠定了基础.