Tat融合蛋白表达载体TAT-c-Myc的克隆化及蛋白表达研究

• 作者: 万志红 王建军 谢国明 赵平 辛绍杰 靳雪源
• 来源期刊: 中华临床医师杂志（电子版）
• 关键词: 原癌基因蛋白质c-myc 多能干细胞 蛋白转导结构域 载体构建
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 页码范围: 788-792
• 页数: 5页
• 字数: 3566字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-0785.2015.05.020

摘要

目的：构建重组表达载体TAT-c-Myc，在E.coli BL21中高效表达并纯化融合蛋白。方法经PCR获得编码人c-Myc的全基因序列，含有设计的限制性酶切位点的产物连接到含有TAT转导结构的原核表达载体PET-28b-TAT-V2上，得到重组表达载体TAT-c-Myc，转化大肠杆菌，应用IPTG诱导TAT-c-Myc融合蛋白的表达。表达产物用SDS-PAGE鉴定，亲和层析柱纯化，并应用 Western blot检测蛋白的特异性，融合蛋白转导人皮肤成纤维（HSF）细胞的效果应用免疫荧光检测。结果成功构建了TAT-c-Myc融合蛋白的原核表达载体，在诱导下获得了高效表达。Western blot检测提示融合蛋白有良好的特异性。免疫荧光检测提示融合蛋白具有快速转导入HSF细胞内的能力。结论为进一步的通过蛋白转导方式诱导多能干细胞提供了物质基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	辛绍杰	解放军第302医院肝衰竭诊疗与研究中心	103	831	15.0	25.0
2	王建军	解放军第302医院国际肝病诊疗中心	22	57	3.0	7.0
3	赵平	解放军第302医院国际肝病诊疗中心	28	79	5.0	8.0
4	靳雪源	解放军第302医院国际肝病诊疗中心	17	97	5.0	9.0
5	谢国明	解放军第302医院肝衰竭诊疗与研究中心	5	15	2.0	3.0
6	万志红	解放军第302医院肝衰竭诊疗与研究中心	16	60	5.0	7.0