TAT-Apoptin融合蛋白分泌表达载体的构建及其活性检测

• 作者: 侯伟健 刘雪梅 崔剑 李其久 贲松彬
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 反式激活蛋白 凋亡素 分泌表达 凋亡
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 45-48
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3274字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建具有自主跨膜能力的Apoptin融合蛋白表达载体,使其分泌表达,避开包涵体复性,简化制备工艺.方法 人工合成反式激活蛋白(TAT)序列,与Apoptin序列融合,连接到pET22b+载体上,构建原核分泌表达载体pET22b+-TAT-Apoptin,IPTG诱导目的蛋白分泌表达到大肠杆菌周质空间,提取蛋白行SDS-PAGE分析,MTT法检测分泌表达的融合蛋白对胃癌823细胞的抑制作用.结果 重组TAT-Apoptin蛋白可分泌至大肠杆菌周质空间中,以可溶状态存在,对胃癌823细胞的最大抑制率为83.95％.结论 成功构建重组TAT-Apoptin蛋白表达载体,分泌表达的可溶性融合蛋白具有生物活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李其久	辽宁大学生命科学院生化与分子生物学教研室	33	200	10.0	12.0
2	侯伟健	中国医科大学基础医学院组织工程教研室	41	172	7.0	10.0
3	贲松彬	辽宁大学生命科学院生化与分子生物学教研室	26	181	9.0	12.0
4	崔剑	辽宁大学生命科学院生化与分子生物学教研室	3	27	2.0	3.0
5	刘雪梅	辽宁大学生命科学院生化与分子生物学教研室	1	11	1.0	1.0