TAT-FGF21融合蛋白的构建表达纯化及神经保护活性

• 作者: 陈松 陈苏婷 高向东
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: TAT-FGF21 表达 纯化 神经保护活性 活性氧 线粒体膜电位
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 496-501
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 4810字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20180417

摘要

为了提高成纤维细胞生长因子21(FGF21)的脑内分布而设计TAT-FGF21融合蛋白并探讨其神经保护活性.通过构建pET28a-TAT-FGF21重组质粒,并转化至E.coli BL-21(DE3)感受态细菌,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后通过镍离子金属鳌合亲和层析介质(Ni-NTA)亲和色谱柱分离纯化获得TAT-FGF21融合蛋白.随后利用Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞损伤模型,并以TAT-FGF21融合蛋白进行干预.MTT法检测TAT-FGF21对Aβ25-35致SH-SY5Y细胞活性下降的干预作用;DCFH-DA荧光探针法检测TAT-FGF21对Aβ25-35致SH-SY5Y细胞内活性氧生成增加的干预作用;JC-1荧光探针法检测TAT-FGF21对Aβ25-35致SH-SY5Y细胞线粒体膜电位异常下降的干预作用.结果显示,TAT-FGF21能够提高SH-SY5Y细胞活性、降低SH-SY5Y细胞内ROS生成水平、提高SH-SY5Y细胞线粒体膜电位,提示TAT-FGF21可以通过缓解氧化损伤发挥神经保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高向东	中国药科大学生命科学与技术学院江苏省生物药物成药性研究重点实验室	188	1604	21.0	30.0
2	陈苏婷	中国药科大学生命科学与技术学院江苏省生物药物成药性研究重点实验室	3	32	2.0	3.0
3	陈松	中国药科大学生命科学与技术学院江苏省生物药物成药性研究重点实验室	9	43	4.0	6.0