抗性候选基因GmMIOX4的表达分析、克隆及过表达载体的构建

• 作者: 于佰双 刘婷 杨若巍 段玉玺 王学敏 王惠
• 来源期刊: 大豆科学
• 学科: 农学
• 关键词: GmMIOX4基因 大豆胞囊线虫 实时荧光定量PCR 克隆 过表达载体
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 730-735
• 分类号: Q78|S565.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.11861/j.issn.1000-9841.2016.05.0730

摘要

将两个不同抗性大豆品种灰皮支黑豆和辽豆15人工接种大豆胞囊线虫3号生理小种(SCN3),利用实时荧光定量PCR技术,对SCN3侵染后的早期和线虫完成一个整个生活史时的GmMIOX4基因相对表达量变化进行分析.结果表明:在SCN3侵染下,辽豆15根内的GmMIOX4基因在25 dpi时,相对表达量升高,而灰皮支黑豆根内的GmMI-OX4基因在10 dpi时被诱导表达,相对表达量达到最高值,表明该基因在此时期发挥一定作用.线虫侵入大豆根内10 d是其通过合胞体吸取寄主营养从而维持正常生长发育的时期,在10 dpi该基因被诱导表达,使其合胞体结构发生改变,从而抑制线虫发育,最终导致死亡或使灰皮支黑豆根内成虫数量减少,起到抗病效果.随后以抗性品种灰皮支黑豆根系总RNA为模板,利用RT-PCR技术获得了939 bp的GmMIOX4基因的CDS序列,克隆得到质粒pGEM-MI-OX4,再以得到的GmMIOX4序列为材料构建过表达载体pCAM-MIOX4,为进一步研究GmMIOX4基因功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于佰双	黑龙江省农业科学院大豆研究所	23	87	7.0	8.0
2	段玉玺	沈阳农业大学植物保护学院	237	2380	22.0	37.0
3	王惠	沈阳农业大学生物科学技术学院	33	214	9.0	13.0
4	刘婷	沈阳农业大学生物科学技术学院	15	133	7.0	11.0
5	杨若巍	沈阳农业大学生物科学技术学院	3	2	1.0	1.0
6	王学敏	沈阳农业大学生物科学技术学院	3	2	1.0	1.0