小鼠microRNA-31反转录病毒载体重组质粒的构建及鉴定

• 作者: 冯晖晖 刘霞 周小明 夏圣 张彩云 张璐玢 徐晓昱 谢梦晓 陈云鹏
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: microRNA-31 反转录病毒载体 重组质粒
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 26-30
• 页数: 5页
• 分类号: R393
• 字数: 2869字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13312/j.issn.1671-7783.y150130

摘要

目的:以pMSCV-puro载体(MGP)为骨架,构建带有绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的小鼠microRNA-31(miR-31)反转录病毒载体MGP-31.方法:PCR扩增带有NotⅠ以及XhoⅠ酶切位点的miR31的前体(premiR-31)序列,然后克隆至MGP载体上,测序鉴定.将构建的MGP-31质粒转染HEK-293T细胞,通过荧光显微镜观察GFP的表达情况,实时定量PCR检测miR-31转录水平以评估MGP-31质粒的转染效率.结果:基因序列分析显示pre-miR-31基因序列正确,并成功插入MGP载体,转染HEK-293T细胞可表达GFP,实时定量PCR结果表明转染MGP-31质粒的HEK-293T细胞可高表达miR-31.结论:MGP-31反转录病毒载体构建成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏圣	江苏大学医学院	15	47	5.0	6.0
2	刘霞	江苏大学医学院	10	29	3.0	5.0
3	周小明	江苏大学医学院	2	0	0.0	0.0
4	张璐玢	江苏大学医学院	2	0	0.0	0.0
5	谢梦晓	江苏大学医学院	2	1	1.0	1.0
6	陈云鹏	江苏大学医学院	1	0	0.0	0.0
7	徐晓昱	江苏大学医学院	1	0	0.0	0.0
8	张彩云	江苏大学医学院	1	0	0.0	0.0
9	冯晖晖	江苏大学医学院	1	0	0.0	0.0