党参CpUGPase基因的克隆、序列分析与原核表达

• 作者: 孙海峰 李晶 郭琼琼 高建平
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 党参 CpUGPase 基因克隆 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2016,（21）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 3876-3883
• 分类号: R282.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.21.021

摘要

目的 为研究党参多糖代谢途径,从党参Codonopsis pilosula根中克隆多糖代谢关键酶尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶CpUGPase基因,并进行序列分析和原核表达.方法 根据党参转录组中CpUGPase基因序列设计引物,通过RT-PCR扩增得CpUGPase开放阅读框(ORF)序列,并进行TA克隆、测序和序列分析;构建原核表达载体PET-28a-CpUGPase,转入大肠杆菌BL21 (DE3)后,在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下进行表达.结果 CpUGPase ORF序列全长1 413bp,编码470个氨基酸.序列分析表明,CpUGPase基因具有保守的UGPase euk催化位点,属于A型糖基转移酶蛋白家族.构建PET-28a-CpUGPase重组质粒,获得稳定的原核表达体系.SDS-PAGE结果显示该蛋白的大小约54 900,与预测的蛋白相对分子质量一致.结论 从党参根中克隆得到CpUGPase基因,并建立了稳定的原核表达体系,为进一步纯化CpUGPase蛋白,研究其结构和功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晶	山西医科大学药学院	42	168	6.0	11.0
2	孙海峰	山西大学化学化工学院	36	509	12.0	21.0
3	高建平	山西医科大学药学院	50	501	11.0	22.0
4	郭琼琼	山西医科大学药学院	3	14	2.0	3.0