慢病毒包装体系的建立与体外表达

• 作者: 朱玉博 王维 王雪晗 白文林 罗光彬 许诺 贾俊龙
• 来源期刊: 沈阳农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 慢病毒 转染 293T细胞 滴度
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 姻研究报告
• 页码范围: 432-437
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 3962字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1700.2016.04.008

摘要

为筛选出最佳的慢病毒转染处理时间,研究三质粒对慢病毒包装的最佳浓度配比,以及对293T细胞的细胞转染率和滴度,通过脂质体与Fugw质粒混合后转染293T细胞,观察293T细胞的形态和荧光表达量。结果表明：转染6h组的细胞形态略好于8h；转染8h组和6h组的转染率均极显著高于10h组(p﹤0.01),但彼此间差异不显著(p>0.05)；质粒配比为4：3：2时,慢病毒滴度最高,达3.795×107 TU?mL-1,经离心后滴度与离心之前相比能提高100倍。不同浓度的质粒配比对293T细胞转染率和滴度方面,B组(4：3：2)的转染率最高、C组(3：2：1)最低、A组(5：4：3)介于二者之间,3组间彼此差异极显著(p﹤0.01)；转染后B组的滴度极显著高于A组和C组(p﹤0.01),而A组和C组间差异不显著(p>0.05)。感染293T靶细胞存在EGFP基因表达。利用10μL脂质体2000介导4μg的Fugw质粒转染293T细胞的最佳时间为6h；当Fugw：?8.2：Vsvg为4：3：2时,慢病毒转染293T细胞的效果最好。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗光彬	沈阳农业大学畜牧兽医学院	134	486	10.0	13.0
2	白文林	沈阳农业大学畜牧兽医学院	78	348	9.0	14.0
3	王维	沈阳农业大学畜牧兽医学院	9	25	3.0	4.0
4	王雪晗	沈阳农业大学畜牧兽医学院	2	1	1.0	1.0
5	贾俊龙	沈阳农业大学畜牧兽医学院	5	7	1.0	2.0
6	朱玉博	沈阳农业大学畜牧兽医学院	6	12	1.0	3.0
7	许诺	沈阳农业大学畜牧兽医学院	2	1	1.0	1.0