PP2A B56α调节亚基原核表达载体的构建及表达

• 作者: 孙晓莉 张朝 李良渊 程晓清 赵亚平
• 来源期刊: 南京师大学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: PP2A B56α 原核表达
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 74-78
• 页数: 5页
• 分类号: Q28
• 字数: 3151字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-4616.2016.03.013

摘要

为了构建PP2A B56α调节亚基原核表达载体,以pCEP-4HA-B56α质粒为模板,设计引物克隆人源PP2A B56α cDNA,连入pGEX-4T-1载体中,测序正确后,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,并将诱导表达重组蛋白的菌体超声破碎后,进行可溶性分析,对可溶性蛋白进行纯化.SDS-PAGE电泳及Western Blot分析鉴定重组蛋白.结果表明,经测序和酶切鉴定后成功构建重组质粒pGEX-4T-1-B56α,表达大小约79 kD的重组蛋白,可溶性表达的重组蛋白为菌体总蛋白质量的8.6％,经GST纯化系统纯化得到纯度约为78.9％的重组蛋白,回收率达到52.2％.因此,本研究成功构建了PP2A B56α原核表达体系,获得重组蛋白,为研究PP2A B56α的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙晓莉	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	8	122	2.0	8.0
2	张朝	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	10	7	1.0	2.0
3	赵亚平	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	2	1	1.0	1.0
4	程晓清	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	1	0	0.0	0.0
5	李良渊	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	1	0	0.0	0.0