肺炎衣原体Taqman探针实时荧光定量PCR检测法

• 作者: 程永婷 贾天军 贾晓晖 马良
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺炎衣原体 Taqman探针 实时荧光定量PCR Cpn0308
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 343-346
• 页数: 4页
• 分类号: R446.5
• 字数: 3955字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2016.05.08

摘要

目的 针对Cpn0308基因建立检测肺炎衣原体的Taqman探针实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法.方法 根据肺炎衣原体包涵体膜蛋白Cpn0308基因序列设计引物和Taqman探针,建立Taqman FQ-PCR检测体系,对反应体系进行优化,进行灵敏度、特异性、重复性评价;并与商品化肺炎衣原体核酸检测试剂盒检测临床标本进行对比分析.结果 肺炎衣原体TaqmanFQ-PCR方法的引物浓度300 nmol/L,探针浓度200 nmol/L,Mg2+ 4.0 mmol/L为最优反应条件;灵敏度为8.36×102copies/μL;该法对常见几种呼吸道病原菌及沙眼衣原体无交叉反应;重复性试验中4个浓度变异系数均小于3％.自建方法与商品化试剂盒对呼吸道感染组、心血管疾病组及正常对照组标本检出率分别为10％vs 10％ (x2 =0.167,P＞0.05),44.44％vs 40.74％(x2 =0,P＞0.05),6.67％ vs3.33％(x2 =0,P＞0.05),各组阳性率间差异无统计学意义;2种方法的总阳性率(16.54％ vs 14.96％)比较差异无统计学意义(x2=0.071,P＞0.05).结论 本研究建立的Taqman探针实时荧光定量PCR检测肺炎衣原体的方法灵敏度好,特异性高,重复性好,可应用于临床肺炎衣原体核酸检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾天军	河北北方学院病原生物学与免疫研究所临床检验诊断学重点实验室	100	295	7.0	14.0
2	贾晓晖	河北北方学院病原生物学与免疫研究所临床检验诊断学重点实验室	31	57	5.0	6.0
3	程永婷	河北北方学院病原生物学与免疫研究所临床检验诊断学重点实验室	7	5	1.0	2.0
4	马良	河北北方学院病原生物学与免疫研究所临床检验诊断学重点实验室	6	5	1.0	2.0