CYP2C8及 CYP3A4细胞表达体系的构建及其在小分子激酶药物对紫衫醇代谢途径抑制研究中的应用

• 作者: 张洪建 李佳俊 李远 汪维鹏 黄洁琼
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 紫杉醇 代谢酶 基因多态性 小分子激酶抑制剂 药物相互作用
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 227-233
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.07.032

摘要

构建 CYP2C8及其3种突变体细胞表达体系，以紫杉醇为底物研究 CYP2C8基因多态性对其酶活性的影响，以及构建 CYP2C8和 CYP3A4共转染细胞体系研究小分子激酶抑制剂对紫杉醇代谢途径的抑制。根据基因文库分别合成 CYP3A4以及CYP2C8及其3种突变体 CYP2C8*2（805A>T）、CYP2C8*3（416G>A，1196A>G）、CYP2C8*4（792C>G）的基因编码片段，将其连接到 PEGFP-N1表达质粒，测序验证。将 CYP2C8野生型及其突变体分别转染 HepG2细胞，24 h 后加入紫杉醇进行孵育，通过建立好的 LC-MS/MS 方法对代谢物进行定量分析。同时，也将野生型 CYP2C8和 CYP3A4质粒按一定的浓度比转入 HepG2细胞构建共表达体系。并筛选出合适的质粒浓度比转染细胞，在加入紫杉醇孵育时，同时加入小分子激酶抑制剂，考察小分子激酶抑制剂对紫杉醇代谢途径的抑制作用。结果表明，CYP2C8*4代谢酶对紫杉醇的代谢能力存在明显差异，其中 CYP2C8*2和 CYP2C8*3代谢活性分别是野生型的81%（P<0.05）和87%（P<0.05），而 CYP2C8*4则是野生型的65%（P<0.01）。尼洛替尼完全抑制了紫杉醇的代谢，阿法替尼对紫杉醇的两条代谢途径抑制达30%，而伊马替尼选择性抑制了 CYPD3A4的活性。不同基因型 CYP2C8对紫杉醇的代谢存在差异，可能是导致临床疗效不同的原因。小分子激酶抑制剂在与紫杉醇联合使用时，对紫杉醇代谢的抑制各不相同。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪维鹏	苏州大学药学院	24	50	4.0	6.0
2	黄洁琼	苏州大学药学院	4	3	1.0	1.0
3	李远	苏州大学药学院	1	0	0.0	0.0
4	李佳俊	苏州大学药学院	2	2	1.0	1.0
5	张洪建	苏州大学药学院	3	5	2.0	2.0