大鼠ASIC1基因启动子荧光素酶报告质粒的构建及其功能鉴定

• 作者: 代贝贝 吴小山 周仁鹏 李悦 王志强 王志森 葛金芳 谢亚亚 陈飞虎
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: ASIC1 启动子 荧光素酶 报告基因
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 620-623,624
• 页数: 5页
• 分类号: R392.2
• 字数: 3811字
• 语种: 中文

摘要

目的：构建大鼠酸敏感离子通道1(ASIC1)基因启动子荧光素酶报告质粒pGL3-ASIC1-promoter,并进行功能的鉴定。方法设计、合成ASIC1启动子引物,采用聚合酶链反应( PCR)技术从大鼠全基因组DNA中扩增出ASIC1启动子片段；Nhe I和Xho I双酶切后将目的片段连接到pGL3-Basic报告载体上；构建的pGL3-ASIC1-promoter重组质粒和pRL-TK内参质粒瞬时共转染293T细胞检测ASIC1启动子活性。结果 PCR扩增得到大鼠ASIC1基因启动子片段；成功构建pGL3-ASIC1-promoter报告基因载体,菌落 PCR和测序结果表明启动子DNA序列正确。与空质粒pGL3-Basic转染组相比,pGL3-ASIC1-promoter质粒转染组的荧光素酶活性明显增加(P<0．01)。结论成功构建了大鼠ASIC1基因启动子报告基因载体,为探究ASIC1转录表达的调控机制奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	葛金芳	安徽医科大学药学院	73	898	14.0	28.0
2	陈飞虎	安徽医科大学药学院	211	2068	22.0	32.0
3	李悦	安徽医科大学药学院	4	12	2.0	3.0
4	周仁鹏	安徽医科大学药学院	7	18	3.0	4.0
5	代贝贝	安徽医科大学药学院	2	0	0.0	0.0
6	吴小山	安徽医科大学药学院	3	5	2.0	2.0
7	王志森	安徽医科大学药学院	3	6	2.0	2.0
8	谢亚亚	安徽医科大学药学院	1	0	0.0	0.0
9	王志强	安徽医科大学药学院	1	0	0.0	0.0