含人FABP4基因启动子荧光素酶报告质粒的构建及鉴定

• 作者: 刘善淘 刘成成 刘革修 朱锦灿 祝爱珍 陈小宇
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: FABP4 启动子 荧光素酶 质粒 转染
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 166-169
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 字数: 2195字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建含有人脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4)基因启动子荧光素酶报告基因质粒pGL3-Ba.ic-FABP4-promoter,为脂类代谢相关药物研究提供基础.方法 根据已知人的FABP4基因启动子序列设计引物,以人DNA为模板,用PCR法扩增出人FABP4基因启动子的DNA大片段.经过限制性内切酶KpnI和XhoI双酶切后插入到pGL3-Basic载体中;测序鉴定;然后将这些重组质粒瞬时转染到K293细胞中,并在24h后检测其荧光素酶活性.结果 构建的含荧光素酶基因的质粒,经酶切及测序鉴定结果显示FABP4启动子插入的位置和序列正确.转染细胞后检测其荧光显示:重组pGL3质粒转录活性较pGL3-Basic质粒明显增强(P＜ 0.001).结论 成功构建了pGL3-Basic-FABP4-promoter质粒,为进一步研究FABP4基因的表达调控提供了工具和基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘革修	暨南大学血液病研究所	89	330	10.0	11.0
2	刘成成	暨南大学血液病研究所	24	107	6.0	8.0
3	祝爱珍	暨南大学血液病研究所	24	103	6.0	8.0
4	陈小宇	暨南大学血液病研究所	18	103	7.0	9.0
5	朱锦灿	暨南大学血液病研究所	13	54	5.0	7.0
6	刘善淘	暨南大学血液病研究所	7	28	2.0	5.0