人SOX7启动子荧光素酶报告质粒构建及HMGA2对其活性影响的研究

• 作者: 孔德全 方勇木 李军 查郎 王子卫 蒲斌
• 来源期刊: 中华肿瘤防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: SOX7 HMGA2 荧光素酶报告质粒 启动子活性
• 年，卷（期）: 2016,（19）
• 所属期刊栏目: 实验研究/论著
• 页码范围: 1282-1286
• 分类号: R73-3
• 语种: 中文

摘要

目的 研究发现,HMGA2促进肿瘤细胞发生EMT与其下游基因SOX7有关.为进一步验证转录因子HM-GA2与其下游基因SOX7之间的调控关系,本研究通过构建人SOX7基因启动子荧光素酶报告质粒,采用荧光素酶报告实验观察HMGA2对SOX7基因启动子荧光素酶活性的影响,为研究HMGA2转录表达的调控机制提供必要的实验基础.方法 采用PCR技术扩增人SOX7基因启动子序列(-1 549～+79nt),将SOX7基因启动子插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中构建质粒pGL3-SOX7-promoter;再分别将pGL3-SOX7-promoter、pGL3-basic-SOX7-promoter和对照质粒(pLV-UbC-IRES2-EGFP)、pGL3-SOX7-promoter和HMGA2表达质粒(pLV-UbC-HMGA2-IRES2-EGFP)3组质粒共转染293T细胞,培养48 h后,检测3组荧光素酶的表达情况,观察HMGA2对SOX7基因启动子的调控作用.结果 通过菌落PCR和核酸测序证实,人SOX7基因启动子荧光素酶报告质粒pGL3-SOX7-promoter构建成功;将pGL3-SOX7-promoter和HMGA2表达质粒(pLV-UbC-HMGA2-IRES2-EGFP)共转染293T细胞48 h后,与对照组相比,SOX7基因启动子介导荧光素酶的活性降低约31％,受到明显抑制(P=0.003),提示HMGA2可能调控SOX7基因启动子的活性.结论 本研究成功构建了SOX7基因启动子荧光素酶报告质粒,初步验证了SOX7是HMGA2下游的作用靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王子卫	重庆医科大学附属第一医院胃肠外科	114	587	12.0	18.0
2	李军	福建中医药大学第四临床医学院普通外科	11	50	4.0	6.0
3	查郎	重庆医科大学附属第一医院胃肠外科	15	48	4.0	6.0
4	孔德全	福建中医药大学第四临床医学院普通外科	1	1	1.0	1.0
5	蒲斌	福建中医药大学第四临床医学院普通外科	1	1	1.0	1.0
6	方勇木	福建中医药大学第四临床医学院普通外科	2	7	1.0	2.0