重组酶Xar的表达纯化及性质研究

• 作者: 叶兆伟 王锐丽 薛业敏
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 木糖苷酶 耐热性 纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 140-143,147
• 页数: 5页
• 分类号: S816.7
• 字数: 3362字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2016.05.028

摘要

为获得高效的半纤维素类饲料酶制剂,将含嗜热厌氧乙醇菌α-阿拉伯糖苷酶/木糖苷酶(Xar)基因的重组质粒pET-20b-xar导入大肠杆菌DH10B中,经IPTG诱导进行高效表达,将表达的重组酶进行热处理和Ni2亲和层析纯化,并对纯化的重组酶Xar的性质进行研究.结果表明,以对硝基苯酚-α-阿拉伯呋喃糖苷(pNPAF)为底物,重组酶Xar的最适反应温度和最适pH值分别是75 ～ 80℃和6.0,米氏常数(Km)、最大反应速度(Vmax)分别为2.42 mmol/L、20.7 μmol/(min· mg);以对硝基苯酚-β-木糖苷(pNPX)为底物,重组酶Xar的最适反应温度和最适pH值分别为93℃和5.8 ～6.2,Km、Vmax值分别为0.60 mmol/L、43.8 μmol/(min· mg).将重组酶Xar置于80℃保温1h,木糖苷酶的相对活性仍为56.4％,在pH值4.2 ～8.2条件下仍保持较高的稳定性.当木糖浓度达到400 mmol/L时,木糖苷酶的相对活性仍有97.9％.Mn2+对重组酶Xar有明显的激活作用,而Cu2+和Zn2+对其有明显的抑制作用.可见,重组酶Xar具有良好的热稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	叶兆伟	信阳农林学院生物与制药工程学院	35	68	5.0	6.0
2	王锐丽	信阳农林学院生物与制药工程学院	19	43	4.0	5.0
3	薛业敏	南京师范大学金陵女子学院	8	18	2.0	4.0