南定病毒标准血清制备及间接ELISA检测方法的建立

• 作者: 刘晓娜 刘渠 周健明 朱礼平 梁克峰 王婧颖 王德全
• 来源期刊: 实用预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 南定病毒(NDiV) 小鼠接种 ELISA方法
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 方法研究
• 页码范围: 1144-1146,封3
• 页数: 4页
• 分类号: R-33
• 字数: 3965字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-3110.2016.09.039

摘要

目的 制备南定病毒(NDiV)标准血清,建立ELISA检测方法,为在人群中监测南定病毒感染状况提供方法.方法 用南定病毒感染3周龄SPF级BALB/c小鼠,分别在0、7、14 d以腹腔注射的方式免疫SPF级6～8周龄BALB/c小鼠,免疫血清用IFA法进行鉴定;南定病毒感染C6/36细胞,制备ELISA抗原,确定酶结合物、抗原和标准阳性血清的最佳工作浓度,建立南定病毒ELISA检测方法,进行敏感性、特异性、重复性和稳定性实验.结果 制备南定病毒免疫血清,以IFA测定血清效价为1∶320,与呼吸道合胞病毒、腺病毒均无交叉反应;建立了ELISA检测方法,确立了各种试剂的最佳工作浓度,其中酶结合物最佳工作浓度为1∶10000,抗原为2.3μg/ml,阳性参考血清为1∶200;ELISA检测灵敏度为1:3 200.板内特异抗原、正常抗原平均变异系数为4.56％和5.17％,板间为3.38％和6.64％.稳定性实验相对偏差均小于20％.结论 本研究制备的南定病毒免疫血清可作为血清学检测方法中的标准质控血清;建立的ELISA方法重复性、稳定性好,敏感性和特异性强,可用于南定病毒血清抗体检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王德全	广东药学院公共卫生学院	63	506	12.0	19.0
2	刘渠		121	668	13.0	19.0
3	梁克峰	广东药学院公共卫生学院	5	17	2.0	4.0
4	周健明		11	18	2.0	4.0
5	刘晓娜	广东药学院公共卫生学院	1	1	1.0	1.0
6	朱礼平	广东药学院公共卫生学院	1	1	1.0	1.0
7	王婧颖	广东药学院公共卫生学院	1	1	1.0	1.0