大鼠C-sis基因克隆及其真核表达载体的构建

• 作者: 丁浩 孙国芳
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 实验动物 基因病毒载体相关因子模型 基因克隆 C-sis 大鼠 转染 真核表达载体 酶切 脂质体 鼠尾静脉 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2016,（49）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 基因病毒载体相关因子模型
• 页码范围: 7418-7424
• 页数: 7页
• 分类号: R318
• 字数: 5874字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.49.018

摘要

背景：原癌基因C-sis具有促进细胞增殖并抑制凋亡，进而促进组织修复的功能。假设C-sis可能在受损肝组织的修复和暴发性肝衰竭的治疗中发挥积极作用。<br>　　目的：构建pcDNA3.1/C-sis真核表达载体，检测其在大鼠正常肝细胞株BRL细胞和在体大鼠肝脏细胞中的表达。<br>　　方法：通过RT-PCR的方法克隆C-sis基因的选全长编码序列，构建pcDNA3.1/C-sis真核表达载体。鉴定无误后经脂质体介导转染到BRL细胞中，并通过将质粒注入尾静脉后导入大鼠肝脏。最后通过荧光定量PCR和Western Blot鉴定其在BRL细胞和在体大鼠肝脏细胞中的表达。<br>　　结果与结论：①成功克隆了C-sis基因全长编码区；测序证明pcDNA3.1/C-sis重组真核表达载体构建成功；②将其转染至BRL细胞和在体大鼠肝脏，可使C-sis表达升高；③实验结果为后续研究C-sis基因对大鼠暴发性肝衰竭的影响提供了先决条件。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁浩	南昌大学第二附属医院消化内科	22	47	5.0	6.0
2	孙国芳	南昌大学第二附属医院心电诊断室	10	13	2.0	3.0