为实现rhCG融合蛋白在CHO细胞中的高效表达,构建两个不同的 His-tag rhCG 融合蛋白真核表达载体,通过瞬时转染比较两个载体在CHO-dhfr-细胞中的表达量,选择表达量较高的载体稳定转染CHO-dhfr -,并采用氨甲喋呤( MTX)进行加压筛选高表达单克隆细胞株。加压后,表达量由1日1300mIU? mL -1提高至18000mIU? mL -1(以106个细胞计)。该克隆株经传代50代以后,rhCG表达量未发生明显变化,表明该克隆为稳定克隆株。用Ni+螯合亲和层析及凝胶过滤层析分离纯化表达产物,获得纯度大于99%的rhCG融合蛋白,SDS-PAGE电泳及 Western Blot结果表明rhCG得到正确及完整的表达,生物学活性测定结果表明样品比活为11000IU? mg -1。