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摘要:
为实现rhCG融合蛋白在CHO细胞中的高效表达,构建两个不同的 His-tag rhCG 融合蛋白真核表达载体,通过瞬时转染比较两个载体在CHO-dhfr-细胞中的表达量,选择表达量较高的载体稳定转染CHO-dhfr -,并采用氨甲喋呤( MTX)进行加压筛选高表达单克隆细胞株。加压后,表达量由1日1300mIU? mL -1提高至18000mIU? mL -1(以106个细胞计)。该克隆株经传代50代以后,rhCG表达量未发生明显变化,表明该克隆为稳定克隆株。用Ni+螯合亲和层析及凝胶过滤层析分离纯化表达产物,获得纯度大于99%的rhCG融合蛋白,SDS-PAGE电泳及 Western Blot结果表明rhCG得到正确及完整的表达,生物学活性测定结果表明样品比活为11000IU? mg -1。
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文献信息
篇名 rhCG融合蛋白在CHO细胞中的表达、纯化与鉴定
来源期刊 海峡药学 学科 医学
关键词 rhCG 内部核糖体进入位点 CHO-dhfr- MTX
年,卷(期) 2016,(7) 所属期刊栏目 ? 实验研究?
研究方向 页码范围 257-260
页数 4页 分类号 Q786|R965
字数 4101字 语种 中文
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研究主题发展历程
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rhCG
内部核糖体进入位点
CHO-dhfr-
MTX
研究起点
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
海峡药学
月刊
1006-3765
35-1173/R
大16开
福建省福州市通湖路330号
1988
chi
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