新型核苷碱基卤化酶AcmX的原核表达和结晶

• 作者: 张金珠 朱晓峰 杨婷 柯丹
• 来源期刊: 四川大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 核苷碱基卤化酶 位点特异的卤化反应 与分子伴侣蛋白共表达 蛋白结晶
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 生物学
• 页码范围: 1113-1118
• 页数: 6页
• 分类号: Q55
• 字数: 5722字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0490-6756.2017.05.038

摘要

在链霉菌中发现了一类能对核苷碱基进行特异位点卤化修饰的新型卤化酶,通过表达纯化新型卤化酶的活性蛋白、制备蛋白晶体,可对其进行蛋白结构的解析,揭示生物催化卤化反应的机理.在大肠杆菌直接原核表达AcmX,只能得到没有活性的AcmX的蛋白包涵体.借助分子伴侣的表达质粒pGro7,构建AcmX、分子伴侣的共表达系统,发现在30℃,0.5 mMIPTG和0.3g/L阿拉伯糖诱导表达3h,可避免目标蛋白AcmX包涵体的形成,并得到足够表达量的目标蛋白,通过高分辨率的分子筛凝胶层析步骤,可去除混入AcmX样品的分子伴侣蛋白GroEL,得到可以用于结晶实验的高均一性的活性AcmX蛋白样品.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨婷	四川大学生命科学学院	49	265	7.0	15.0
2	朱晓峰	四川大学生命科学学院	6	9	1.0	3.0
3	柯丹	四川大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0
4	张金珠	四川大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0