花狭口蛙海南亚种皮肤cDNA文库的构建及鉴定

• 作者: 张英霞 满初日嘎 王思珍
• 来源期刊: 内蒙古民族大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: cDNA文库 SMART技术 花狭口蛙皮肤
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 生物学研究
• 页码范围: 516-520
• 页数: 5页
• 分类号: S917
• 字数: 3512字
• 语种: 中文
• DOI: 10.14045/j.cnki.15-1220.2017.06.014

摘要

在两栖动物,尤其是蛙皮肤中已分离得到多种生物学活性物质.而构建皮肤cDNA文库,有助于筛选活性组分,并保存其功能基因.本试验以花狭口蛙皮肤组织为材料,根据Trizol法提取皮肤总RNA后,使用Creator?SMART?cDNA文库构建试剂盒,运用SMART技术构建文库,经反转录反应合成cDNA第一链,LD PCR法将第一链产物扩增再合成双链cDNA;经蛋白酶K和Sfi I消化后,用CHROMA APIN-400分离双链cD-NA;将合适大小的ds cDNA通过T4DNA连接酶16℃过夜孵育连接到经过相同酶切的pDNR-LIB载体中,体外包装后转染DH5α宿主菌,构建形成原始文库,进行滴度测试.研究表明,构建的花狭口蛙皮肤cDNA文库原始文库滴度为1.18×108 PFU/mL,插入片段大小不同,没有特异性,构建的文库不符合要求,不可用于大规模的功能基因分析,但可为花狭口蛙皮肤抗菌肽基因的前期研究提供借鉴.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王思珍	内蒙古民族大学动物科技学院	92	357	10.0	15.0
2	满初日嘎	内蒙古民族大学动物科技学院	6	32	3.0	5.0
4	张英霞	海南大学海洋学院	19	141	5.0	11.0