人Kiss-1真核表达荧光载体的构建

• 作者: 刘涛 宋慧 文卉 李胜保
• 来源期刊: 临床消化病杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: Kiss-1基因 食管肿瘤 荧光表达载体 EC-109细胞系
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-3
• 页数: 3页
• 分类号: Q343.1
• 字数: 1875字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/lcxh.j.issn.1005-541X.2017.01.01

摘要

[目的]构建并鉴定人Kiss-1真核表达荧光质粒.[方法]按照Genebank中人Kiss-1序列设计引物,以EC109细胞cDNA为模板,扩增基因片段与载体pIRES2-EGFP连接,得到人Kiss-1真核表达荧光载体并测序鉴定,通过脂质体体外转染至EC-109细胞,根据转染情况分为2组:空载体组(转染pIRES2-EGFP空载体)、转染组(转染pIRES2-EGFP-Kiss-1重组质粒).裂解细胞分别提取RNA和蛋白样品用于检测Kiss-1表达水平.[结果]构建的pIRES2-EGFP-Kiss-1荧光重组质粒,经PCR、酶切、测序结果完全达到预期设计,转染组细胞中Kiss-1 mRNA和蛋白表达水平均显著高于空载体组.[结论]成功重组质粒pIRES2-EGFP-Kiss-1和瞬时表达Kiss-1基因的食管癌细胞,为后续建立Kiss-1高表达阳性细胞克隆奠定了基础,为研究Kiss-1对人食管癌细胞增殖、侵袭和转移能力提供了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	文卉	湖北医药学院附属太和医院消化内科	2	2	1.0	1.0
2	刘涛	湖北医药学院附属太和医院消化内科	27	69	5.0	7.0
3	李胜保	湖北医药学院附属太和医院消化内科	31	122	6.0	9.0
4	宋慧	湖北医药学院附属太和医院神经内科	1	1	1.0	1.0