pcDNA3.1-KISS-1真核表达载体的构建及其对EC1细胞转移的抑制作用

• 作者: 张红艳 李娜 李珊珊 王丰 轩小燕 郑献召 闫爱华
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: KISS-1基因 基因克隆 真核表达载体 食管癌细胞株
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 265-269
• 页数: 5页
• 分类号: R735.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2009.04.002

摘要

目的 克隆人食管组织KISS-1基因及构建真核表达载体pcDNA3.1-KISS-1,并观察其在食管癌EC1细胞中的表达及时EC1细胞侵袭及运动能力的影响.方法 从人正常食管组织中提取总RNA,设计特异性引物,通过逆转录一聚合酶联链反应(RT-PCR)扩增KISS-1基因cDNA序列,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,构建真核表达质粒pcDNA3.1-KISS-1,酶切鉴定及测序分析后用Lipofeetamine脂质体将其转染到食管癌细胞.Western blot法检测其蛋白在EC1细胞中的表达情况;应用细胞运动实验及重建基底膜侵袭实验分析KISS-1表达对EC1细胞运动和侵袭能力的影响.结果 成功克隆了人KISS-1基因全长编码序列,构建了重组真核表达载体pcDNA3.1-KISS-1,脂质体转染后KISS-1基因在EC1细胞中成功表达;转基因组细胞的运动能力(174.6±14.24)和体外穿越重建基底膜的能力(90.44±12.83)明显低于转空质粒组(222.6±30.08,110.22±15.87)和对照组EC1细胞(234.40±14.72,124.78±18.14)(P均<0.05).结论 重组pcDNA3.1-KISS-1真核表达质粒构建成功,并且KISS-1对食管癌细胞的侵袭和运动能力具有抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丰	郑州大学第一附属医院病理科	28	85	5.0	8.0
2	李珊珊	郑州大学第一附属医院病理科	52	152	7.0	9.0
3	闫爱华	郑州大学第一附属医院病理科	17	61	5.0	6.0
4	李娜	新乡医学院病理教研室	68	166	5.0	9.0
5	轩小燕	郑州大学第一附属医院病理科	39	108	6.0	7.0
6	张红艳	郑州大学第一附属医院病理科	9	55	4.0	7.0
7	郑献召	郑州大学第一附属医院病理科	8	31	4.0	5.0