Naa10基因RNA干扰慢病毒载体的构建及其对口腔鳞癌细胞生长的影响

• 作者: 徐江 曾妍 朱茂祥 杨洋 王丹妮 郑军 顾永清 黄瑾
• 来源期刊: 口腔医学研究
• 学科: 医学
• 关键词: N-α-乙酰基转移酶10 慢病毒 RNA干扰 口腔鳞癌
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 707-711
• 页数: 5页
• 分类号: R739.8
• 语种: 中文
• DOI: 10.13701/j.cnki.kqyxyj.2017.07.005

摘要

目的:构建人N-α-乙酰基转移酶10(N-d-acetyltransferase 10,Naa10)基因有效的慢病毒RNAi载体并转染人口腔鳞癌细胞SCC-15,研究其对口腔鳞癌细胞生长的影响.方法:根据人Naa10基因mRNA序列设计合成3个siRNA片段,转染人口腔鳞癌SCC-15细胞株并进行验证,将最有效的干扰序列克隆至pLV-shRNA载体上,测序正确后进行包装,测定病毒颗粒滴度后,将慢病毒感染SCC-15细胞以测定Naa10的表达情况,并通过生长曲线研究干扰Naa10对SCC-15细胞生长的影响.结果:3个靶点的siNaa10均能有效抑制Naa10基因的表达,其中2号靶点最为有效(P＜0.005);重组RNAi质粒pLV-shNaa10经测序证实构建成功,pLV-shNaa10可在293T细胞中成功包装;测定病毒颗粒LV shNaa10、LV NC滴度分别为1.2×109 TU/mL和1.0×109TU/mL;SCC-15细胞感染LV-shNaa10后,Naa10蛋白表达明显降低(P＜0.005);干扰Naa10可促进人口腔鳞癌细胞SCC-15的生长.结论:成功构建了Naa10 shRNA慢病毒表达载体,感染人口腔鳞癌细胞SCC-15后,有效抑制了内源性Naa10基因的表达,干扰Naa10可促进SCC-15细胞的生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨洋		2	0	0.0	0.0
2	朱茂祥		2	0	0.0	0.0
3	郑军		1	0	0.0	0.0
4	徐江		1	0	0.0	0.0
5	顾永清		1	0	0.0	0.0
6	黄瑾		1	0	0.0	0.0
7	王丹妮		1	0	0.0	0.0
8	曾妍		1	0	0.0	0.0