巴马香猪氨基肽酶N截短基因的克隆与原核表达

• 作者: 刘博 张艳 沈志强 王宝琴 王文秀 谢金文
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 巴马香猪 氨基肽酶N 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 29-33
• 页数: 5页
• 分类号: S858.28|Q786
• 字数: 3401字
• 语种: 中文

摘要

为获得猪流行性腹泻病毒(PEDV)受体猪氨基肽酶N(pAPN)抗原,提取巴马香猪小肠绒毛上皮的总RNA,PCR扩增获得pAPN基因的主要抗原区片段,并将其克隆至原核表达载体pET-32a中,将重组质粒pET-32a-pAPN转化大肠埃希菌BL21,通过不同浓度的IPTG、不同诱导时间进行诱导表达,以确定目的蛋白表达的最佳条件.经SDS-PAGE和抗组氨酸标签的单抗进行Western blot检测重组蛋白在大肠埃希菌中的表达,结果显示,原核表达产物在诱导温度37℃、IPTG浓度为0.8 mmol/L,诱导4h可获得最佳表达,产物分子质量约为45 ku,获得的目的蛋白大小与预期一致.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈志强		525	1950	18.0	25.0
2	谢金文		62	253	8.0	12.0
3	王宝琴	滨州学院生物工程学院	19	85	5.0	8.0
4	王文秀		40	160	7.0	10.0
5	张艳	海南省农业科学院畜牧兽医研究所	42	74	3.0	5.0
6	刘博		2	4	1.0	2.0