可诱导性表达多种流感病毒HA蛋白稳定细胞系新型构建方法的研究

• 作者: 张艳晶 王健伟 郭丽 钟辉 韩连连
• 来源期刊: 中华实验和临床病毒学杂志
• 关键词: 流感病毒 PiggyBac转座子 诱导性表达 细胞系构建
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 157-161
• 页数: 5页
• 字数: 4466字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2017.02.016

摘要

目的 建立一条创新性的技术路线快速构建可诱导性表达多种甲型流感病毒(IAV)HA蛋白的细胞系.方法 将多种IAV的HA蛋白基因连接到含有PiggyBac转座子位点的Cumate诱导表达系统中,与PiggyBac转座酶质粒共转染HEK293A细胞系,利用嘌呤霉素筛选阳性细胞,并用Cumate诱导相应病毒蛋白表达. 结果 流式细胞仪检测及Western blot检测结果均表明,加入诱导剂Cumate后,获取的细胞系中绝大部分细胞均开始表达相应的病毒蛋白.结论 利用PiggyBac转座子可以高效率的构建诱导性表达IVA HA蛋白的细胞系.