大鼠Scratch2蛋白锌指结构域的表达与纯化

• 作者: 徐志卿 李岳亭 杨予涛
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: Scratch2 锌指结构域 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 440-445,451
• 页数: 7页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2017.05.0070

摘要

[目的]原核表达大鼠Scratch2基因的C2H2型锌指结构域,纯化获得GST-C2H2融合蛋白.[方法]以新鲜大鼠前额叶脑组织cDNA为模板,利用PCR扩增带有EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ酶切位点的Scratch2基因的锌指结构域后,构建原核表达载体pGEX-4T-1-C2H2,并将其转化至大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导融合蛋白表达,再利用MagneGSTparticles亲和纯化GST-C2H2融合蛋白,最后通过Western Blot鉴定此融合蛋白.[结果]成功构建了pGEX-4T-1-C2H2原核表达载体;在20℃、0.2 mmol/L的IPTG诱导下,GST-C2H2融合蛋白即可有效地表达;经MagneGST particle纯化的GST-C2 H2蛋白可被识别Scratch2锌指结构域的抗体所识别.[结论]纯化的GST-C2H2蛋白可用于后续研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐志卿		29	45	4.0	6.0
2	杨予涛		17	12	2.0	3.0
3	李岳亭		2	0	0.0	0.0