SFTS病毒非结构蛋白重组质粒的构建及其体液免疫原性研究

• 作者: 周宜庆 岳明 李军 艾宇洁 金柯 韩亚萍
• 来源期刊: 中华实验和临床病毒学杂志
• 关键词: SFTS病毒 非结构蛋白 重组质粒 体液免疫应答
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 240-244
• 页数: 5页
• 字数: 4539字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2017.03.013

摘要

目的 研究SFTS病毒(SFTS virus,SFTSV)的非结构蛋白(Nonstructural proteins,NSs)重组质粒的体液免疫原性.方法 利用聚合酶链反应法(Polymerase chain reaction,PCR)构建真核表达质粒pJW4303-NSs、pJW4303-NSs-opt、pJW4303-NSs-Flag;引入Nhe Ⅰ酶切位点及tPA(Tissue plasminogen activator,tPA)信号肽,构建质粒pJW4303-tPA-NSs-opt.将质粒转染至HEK 293T细胞,蛋白质印迹法(Western blot,WB)验证NSs表达.NSs相关质粒免疫BALB/c小鼠,采用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测SFTSV NSs特异性IgG抗体.结果 成功构建了重组NSs质粒,WB验证了NSs可在HEK293T细胞内表达.pJW4303-NSs、pJW4303-NSs-opt、pJW4303-tPA-NSs-opt重组质粒均可诱导小鼠体内产生特异性IgG,其中单优化型质粒pJW4303-NSs-opt的免疫原性较好,在第6、8周的IgG水平显著高于野生型NSs质粒,差异具有统计学意义.结论 本研究构建的SFTSV的NSs重组优化型质粒具有良好体液免疫原性,其中单优化型效果最佳.