人CDK14基因表达荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 仇秦威 张志杰 王倩 石兴源 罗凯 贺智敏 贾晓婷 邓敏 黎谢梦丹
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 细胞周期蛋白依赖性激酶14 基因 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 26-29
• 页数: 4页
• 分类号: Q503
• 字数: 3616字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2017.02.007

摘要

目的 建立一种人细胞周期蛋白依赖性激酶14(CDK14)基因表达荧光定量PCR检测方法.方法 利用Trizol法提取不同人肺癌细胞株中总RNA,以β-Actin和CDK14分别为内参和目的基因,分别设计特异性扩增引物,建立人CDK14基因表达荧光定量PCR检测系统并评估其检测性能.同时将其应用于不同细胞系siRNA干扰前后的CDK14基因相对表达水平检测.结果 经电泳分析、熔解曲线、产物测序确认人CDK14基因表达荧光定量PCR检测系统已建立,其特异性良好,重复性佳(CV=7.13％),线性范围较宽(CDK14与β-Actin分别在Ct值范围22.47～32.96与15.14～27.55间具有良好的相关性,r2=0.9844.).利用该体系检测发现:在HCC827 D5和H1650细胞中CDK14基因高表达;在1～3号干扰片段中,1号片段为有效片段.结论 人CDK14基因表达荧光定量PCR检测方法已成功建立.