高产信号分子AI-2乳酸菌的筛选及其Pfs基因的克隆和表达

• 作者: 吴荣 廉雪花 杨军 田建军 贺银凤 顾悦
• 来源期刊: 微生物学通报
• 关键词: 乳酸菌 信号分子AI-2 S-腺苷高半胱氨酸核苷酶(Pfs) 诱导表达 重组蛋白
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 食品微生物
• 页码范围: 1156-1164
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13344/j.microbiol.china.160475

摘要

[目的]从锡盟地区酸马奶酒分离的乳酸菌中筛选出高产信号分子自体诱导物2(Autoinducer-2,AI-2)的乳酸菌,通过优化其重组蛋白Pfs的诱导条件体外合成信号分子AI-2.[方法]利用生物学发光法对不同乳酸菌产信号分子AI-2的产量进行比较,以高产信号分子AI-2乳酸菌基因组DNA为模板,扩增其S-腺苷高半胱氨酸核苷酶(S-adenosylhomocysteine nucleosidase,Pfs)基因,构建原核表达载体.利用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)进行重组蛋白的诱导表达,通过优化培养基、诱导温度、诱导前菌体密度、IPTG浓度以及诱导时间得到高表达的Pfs蛋白,使其与底物作用最终体外合成信号分子AI-2.[结果]10株乳酸菌均可产信号分子AI-2,其中屎肠球菌8-3分泌信号分子AI-2的产量明显高于其他菌株;重组蛋白的最佳诱导条件为:选取SOC (Super optimal broth with catabolite repression)作为诱导表达培养基,菌液OD600为0.5-0.7时加入终浓度为0.1 mmol/L的IPTG,37℃诱导12 h;利用最优诱导条件获得了浓度为4.08 g/L的纯化Pfs蛋白,体外合成了信号分子AI-2.[结论]酸马奶酒中分离出的10株乳酸菌均可产生信号分子AI-2,且屎肠球菌8-3可通过Pfs基因的作用生成信号分子AI-2.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田建军	内蒙古农业大学食品科学与工程学院	44	205	8.0	12.0
2	贺银凤	内蒙古农业大学食品科学与工程学院	67	606	13.0	22.0
3	吴荣	内蒙古农业大学食品科学与工程学院	4	8	2.0	2.0
4	顾悦	内蒙古农业大学食品科学与工程学院	9	23	3.0	4.0
5	杨军	内蒙古农业大学食品科学与工程学院	3	20	2.0	3.0
6	廉雪花	内蒙古农业大学食品科学与工程学院	2	2	1.0	1.0