谷氨酸棒杆菌ATCC14067海藻糖合酶基因的克隆及功能鉴定

• 作者: 徐燕杉 赵难难 郑穗平 都心怡
• 来源期刊: 食品科技
• 学科: 工学
• 关键词: 海藻糖 酶法制备 海藻糖合酶 高效液相色谱
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 生物工程篇
• 页码范围: 1-8
• 页数: 8页
• 分类号: TS201.3
• 语种: 中文

摘要

海藻糖分子是由2个吡喃葡萄糖环以α,α-1,1-糖苷键连接而成的一种十分稳定的非还原二糖,由于其特殊的生物学保护功用,广泛应用于医药、化妆品、食品等多个领域,具有很好的市场前景.目前,海藻糖的生产方法以生物酶法制备为主.其中,利用TreY-TreZ途径由淀粉生产海藻糖和利用TreS途径由麦芽糖生产海藻糖最为经济可行.针对谷氨酸棒杆菌ATCC14067的海藻糖合酶基因(treS)进行基因克隆,将其插入表达质粒pET-22b,在宿主菌E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达,成功得到特异表达的目的蛋白.经高效液相色谱检测证实,该重组酶作用于麦芽糖后,可以产生海藻糖,具有海藻糖合酶的相应活性.在最适反应条件(30℃,pH7.5)下海藻糖合酶的转化效率可达60％～70％.实验系统地对谷氨酸棒杆菌ATCC14067的海藻糖合酶基因进行了异源表达及酶学性质的研究,为其大规模生产及工业化应用奠定了基础.