鹰嘴豆α-淀粉酶抑制剂基因CL-AI的原核表达、纯化及生物学特性

• 作者: 张桦 李林芝 王泽 贾彦凤 阿不都克玉木·米吉提 顾爱星 魏家萍 麻浩
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: α-淀粉酶抑制剂 原核表达 蛋白纯化 发芽
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 852-861
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2017.05.0852

摘要

为研究鹰嘴豆种子中新贮藏蛋白类型α-淀粉酶抑制剂CL-AI的抑制活性、生物活性以及三级结构,本研究利用前期克隆的α-淀粉酶抑制剂基因CL-AI及其2个亚基CL-AI-α、CL-AI-β分别构建原核表达载体pE-SUMO3,经诱导表达获得了CL-AI、CL-AI-α的可溶性融合蛋白和CL-AI-β包涵体融合蛋白,其中CL-AI-β通过构建含不同标签的表达载体,最终实现了可溶性表达.人唾液淀粉酶(HSA)抑制活性试验结果表明,CL-AI,CL-AI-α,CL-AI-β 3个蛋白对HAS都有一定的抑制作用.发芽试验表明,CL-AI蛋白对小麦、玉米、水稻种子发芽过程中的发芽势、根长和芽长影响显著,与加入无菌水的处理相比,种子的简化活力指数显著下降.本研究结果为CL-AI蛋白的后续研究与应用奠定了基础.